Strossmayerov trg 4, HR - 10000 ZAGREB
tel.: (01) 459 44 44, faks: (01) 459 44 69
E-mail: ured@znanost.hr
SVIBOR - Prikupljanje podataka o projektima u RH
Šifra projekta: 1-08-076
REKOMBINACIJA KOD KVASCA-SUPSTRAT I GENETIČKA KONTROLA
Glavni istraživač
: ALAČEVIĆ, MARIJA (182) Suradnici
ZGAGA, ZORAN (77902)
KOREN, PREDRAG (182502)
Tip istraživanja: temeljno Trajanje od: 01.03.91. do 01.03.94. Ukupno radova na projektu: 32
Radovi na projektu citirani u Current Contents: 9
Naziv ustanove: Prehrambeno-biotehnološki fakultet, Zagreb (58) Odjel/Zavod: Zavod za biokemijsko inženjerstvo Laboratorij za biologiju i genetiku mikroorganizama Adresa: Pierottijeva 6 Grad: 10000 - Zagreb, Hrvatska
Komunikacija
Telefon: 385 (041) 417-044
teleFaks: 385 (041) 411-436
E-mail: zgazo@mapbf.pbfrng.hr
Sažetak: Hibridna DNA je središnji intermedijer homologne rekombinacije. Geneticke studije su pokazale da moze sadrzavati i nesparene ili krivo sparene baze, i tada se naziva heterodupleksna DNA. Ovim istraživanjima ispitivan je utjecaj takvih heterologija na efikasnost homologne rekombinacije koristeći integraciju plazmida (jednolančanog i dvolančanog) u kromosom kvasca kao modelni sustav. Plazmidi s izmjenjenim bazama konstruirani su postupkom in vitro mutageneze, a odnos homolognih i homoeolognih integracija određivan je Southern blot tehnikom. Ispitivan je i utjecaj oštećenja izazvanih UV-svjetlom na transformaciju jednolančanim i dvolančanim integrativnim plazmidima, kao i mogućnost transformacije kvasca jednolančanom linearnom DNA. Utjecaj nesparenih baza na proces homologne rekombinacije praćen je i u bakterije Escherichia coli.
Ciljevi istraživanja: Rekombinacijski događaji obično se opisuju ili
kao homologni ili kao ilegitimni. U prvom slučaju u rekombinaciji učestvuju
DNA molekule s istim, ili gotovo istim slijedom nukleotida, a u drugom
nehomologne molekule ili molekule s vrlo kratkom homologijom. Ovim
istraživanjima želi se u prvom redu ispitati kako heterologije utječu na
homolognu rekombinaciju kod kvasca Saccharomyces cerevisiae, koristeći
transformaciju nereplikativnim plazmidom kao modelni sustav. Ta će se
istraživanja nadopuniti istraživanjima na razini genoma kvasca kao i
istraživanjima kod enterobakterija. Nastoji se ustanoviti koliki stupanj
divergencije je toleriran u procesu homologne rekombinacije, kao i opisati
mehanizme koji sprječavaju rekombinaciju između divergentnih sekvencija.
Istraživati će se i transformacija plazmidom ozračenim UV-svjetlom kao i
mogućnost ilegitimne integracije plazmida u genom kvasca. Osim očiglednog
biološkog interesa, ova istraživanja važna su također i radi razvoja
alternativnih strategija za konstrukciju novih sojeva kvasca.
SURADNJA - PROJEKTI
Naziv projekta
: CI1-0528-M DNA repair and strain construction in
yeast Naziv ustanove: Institut Curie, Institut J. Monod Grad: Pariz, Francuska
SURADNJA - USTANOVE
Naziv ustanove
: Institut Jaques Monod Tip ustanove: Sveučilište/Fakultet Tip suradnje: Zajednički projekt Grad: Pariz, Francuska
Naziv ustanove
: Institut Curie Tip ustanove: Državni institut Tip suradnje: Sustavna razmjena informacija Grad: Pariz, Francuska Ostali podaci o projektu.