Strossmayerov trg 4, HR - 10000 ZAGREB
tel.: (01) 459 44 44, faks: (01) 459 44 69
E-mail: ured@znanost.hr
SVIBOR - Prikupljanje podataka o projektima u RH
Šifra projekta: 1-08-308
MOLEKULE STANIČNE POVRŠINE U RAZVOJU I FUNKCIJI LIMFOCITA T
Glavni istraživač
: MARUŠIĆ-GALEŠIĆ, SUZANA (122180) Suradnici
BRAJŠA, KARMEN (187320)
Tip istraživanja: temeljno Trajanje od: 01.01.92. do 31.12.94. Ukupno radova na projektu: 9
Radovi na projektu citirani u Current Contents: 5
Naziv ustanove: Institut "Ruđer Bošković", Zagreb (98) Odjel/Zavod: Zavod za molekularnu medicinu Odjel za biologiju i medicinu Institut "Ruđer Bošković" Adresa: Bijenička 54 Grad: 10000 - Zagreb, Hrvatska
Komunikacija
Telefon: 385 (01) 4561 113
Telefon: 385 (01) 4561 114
teleFaks: 385 (01) 424-239
Sažetak: Istraživali smo razvoj i funkciju limfocita T u miševa kojima je genetskom manipulacijom (gene-knock-out) spriječena ekspresija gena za beta-2 mikroglobulin. Ovi miševi ispoljavaju oko 90% manje MHC molekula I razreda nego normalne životinje. Takodjer je gotovo u potpunosti spriječena diferencijacija citotoksičnih, CD8+ limfocita T u ovih mićeva. Unatoč tome, ovako manipulirane životinje dobro kontroliraju različite infekcije. Istraživali smo da li CD4+ limfociti preuzimaju dio citotoksične funkcije kod ovih miševa i tako omogućuju kontrolu infekcija i odbacivanje stranog transplantata. Pokazali smo da je broj citotoksičnih limfocita T medje CD4+ stanicama znatno povećan u manipuliranih životinja. Takodjer smo istraživali razliku u mehanizmu aktivacije CD4+ i CD8+ limfocita T. Pokazali smo da je proliferacija CD8+ limfocita snažnije inhibirana u prisutnosti imunosupresiva ciklosporina A, negoli proliferacija CD4+ limfocita T. Veća osjetljivost CD8+ limfocita nije posljedica isključivo smanjenog kapaciteta za proizvodnju limfokina od strane CD8+ stanica. Naime, značajno je smanjena i proliferacija CD8+ klona, CTLL, u prisutnosti ciklosporina A iako proliferacija ovog klona ovisi isključivo o izvana dodanom interleukinu 2. SAŽETAK PETOGODIŠNJIH ISTRAŽIVANJA Mnoge bolesti su uzrokovane neadekvatnom regulacijom imunog odgovora. Neophodno je stoga istražiti mehanizme koji upravljaju razvojem i funkcijom limfocita T. Jedna od najvažnijih moleklarnih interakcija koja upravlja razvojem i funkcijom limfocita T je kontakt između receptora za antigen na limfocitima T (TCR) i molekula glavnog sustava tkivne podudarnosti (MHC) na timusnim i izvantimusnim stromalnim stanicama. U eksperimentima smo koristili miševe u kojih je TCR/MHC interakcija sprijećena genetskom manipulacijom ili injiciranjem monoklonskih protutijela. U ovim modelima smo zatim mogli istraživati posljedice nedostatka ovih interakcija na razvoj i funkciju limfocita T. Pokazali smo da nedostatak međudjelovanja TCR i molekula prvog razreda MHC s jedne strane sprečava razvoj CD4-8+ citotoksičnih limfocita, dok s druge strane dovodi do ekspanzije CD4+8- citotoksičnih limfocita. Ekspanzija ove subpopulacije vjerojatno je kompenzacija nepostojanja osnovne populacije citotoksičnih limfocita T. U miševa u kojih molekule MHC drugog razreda nisu ispoljene, ne dolazi do razvoja CD4+8- pomočnićkih limfocita T koji antigen prepoznaju u sklopu molekula drugog razreda MHC. Međutim, broj inače rijetkih CD4-8+ limfocita koji prepoznaju antigen u sklopu molekula drugog razreda MHC znatno je povećan. Broj ovih limfocita vjerojatno je povećan zato što ne dolazi do njihove negativne selekcije nakon kontakta s MHC molekulama drugog razreda, kao što je slučaj u normalnih životinja. Konačno, pokazali smo da neonatalno injiciranje monoklonskih protutijela protiv samo jedne molekule prvog razreda MHC dovodi do značajnih promjena u prepoznavanju stranih molekula prvog razreda u vrlo mladih životinja. Rezultati naših eksperimenata doprinijet će boljem shvaćanju molekularnih interakcija kritičnih za razvoj i funkciju limfocita T.
Ključne riječi: citotoksični limfociti T, molekule glavnog sustava tkivne podudarnosti, MHC molekule, ciklosporin A, aktivacija T limfocita, funkcija, razvoj
Ciljevi istraživanja: 1. U eksperimentalnim modelima u kojima je
spriječena interakcija izmedju MHC molekula na stromalnim stanicama timusa
i CD8 ili CD4, te receptora za antigen (TCR) na limfocitima T istražiti
diferencijaciju i funkciju limfocita T. 2. Istražiti razlike u
aktivacijskim signalima neophodnim za aktivaciju glavnih podskupina
limfocita T: CD4+, CD8+, CD4-8-/gamadelta+. Očekujemo da ćemo utvrditi
kompenzacijske mehanizme djelovanja imunološkog sustava u uvjetima kada je
odredjeni dio sustava blokiran u funkciji. Takodjer vjerujemo da ćemo
istražujući aktivaciju i blokadu aktivacije CD4+ i CD8+ limocita T
utvrditi razlike koje vjerojatno dovode do različite funkcije ovih
podskupina. Neadekvatna regulacija imunog odgovora uzrokom je velikog
broja bolesti kao što su autoimune, kronične infekcije i
imunodeficijencije. Neadekvatan imuni odgovor može biti uzrokovan
promjenama nastalim u funkciji razvijenog, zrelog imunog sustava ili zbog
poremećaja nastalih tijekom razvoja. Neophodno je stoga razotkriti
mehanizme razvoja i funkcije imunološkog sustava, da bi mogli znati kako
manipulirati neadekvatnim imunološkim odgovorom u patološkim stanjima.
Cilj našeg istraživanja je bio pobliže upoznati mehanizme razvoja
različitih populacija limfocita T, koji su osnovni regulatori imunološkog
odgovora. Istraživali smo ulogu različitih molekularnih interakcija
tijekom razvoja. Prvenstveno smo istraživali interakcije između receptora
za antigen (TCR) i/ili CD4 i CD8 ko-receptora limfocita T, s jedne strane
i molekule glavnog sustava tkivne podudarnosti (MHC) na stromalnim
stanicama timusa s druge strane. Pokazano je da kontakt između ovih
molekula igra ključnu ulogu kako u diferencijaciji nezrelih limfocita T,
tako i u aktivaciji i funkciji zrelih limfocita T.
SURADNJA - PROJEKTI
Naziv projekta
: The role of cell surface molecules in T cell
adhesion and activation Naziv ustanove: Labor Dr Peter Walden, Max-Planck Institute fur
Biologie, Abt. Immunegenetik, Grad: 72076 - Tubingen, Germany
Naziv projekta
: Adhesion molecules in T cell function Naziv ustanove: Max-Planck Institute fur Biologie, Abt. Immungenetik Grad: 72076 - Tubingen, Germany
SURADNJA - USTANOVE
Naziv ustanove
: Max-Planck Institute fur Biologie, Abteilung
Immunogenetik Tip ustanove: Državni institut Tip suradnje: Ostalo Grad: 72076 - Tubingen, Germany Ostali podaci o projektu.