Strossmayerov trg 4, HR - 10000 ZAGREB
tel.: (01) 459 44 44, faks: (01) 459 44 69
E-mail: ured@znanost.hr
SVIBOR - Prikupljanje podataka o projektima u RH
Šifra projekta: 3-03-307
KOLIBACILOZA: IMUNOPATOLOGIJA I IMUNOPROFILAKSA DIJAREJE U PRASADI
Glavni istraživač
: VALPOTIĆ, IVICA (66266) Suradnici
GRABAREVIĆ, ŽELJKO (14604)
TOMAŠKOVIĆ, MARIJA (92334)
ĆURIĆ, STIPICA (108013)
GERENČER, MARIJAN (58892)
MARINCULIĆ, ALBERT (139934)
LACKOVIĆ-VENTURIN, GORDANA (105166)
GREGORKO, VESNA (80793)
JERČIĆ, JURE (18592)
ŽUBČIĆ, DAMIR (191460)
TRUTIN-OSTOVIĆ, KARMEN (142676)
HUZJAK, DRAŽEN (161071)
ŠVER, LIDIJA (900613)
Tip istraživanja: primjenjeno Trajanje od: 01.01.91. do 31.12.95. Ukupno radova na projektu: 64
Radovi na projektu citirani u Current Contents: 16
Naziv ustanove: Veterinarski fakultet, Zagreb (53) Odjel/Zavod: Zavod za biologiju Veterinarski fakultet Sveučilišta u Zagrebu Adresa: Heinzelova 55 Grad: 10000 - Zagreb, Hrvatska
Komunikacija
Telefon: 385 (01)2390-144
teleFaks: 385 (01)214-697
E-mail: 161.53.93.3.valpotic
Sažetak: Kolibaciloza odbijene prasadi ekonomski je značajna bolest svinja za koju nema djelotvorne vakcine. Svinjski su F4 (K88)+ enterotoksigeni Escherichia coli (ETEC) sojevi glavni uzročnici dijareje u sisajuće i odbijene prasadi. Pretpostavlja se da su štetni učinci ETEC sojeva posljedica djelovanja enterotoksina, pa bi se netoksigeni (ne-ETEC) sojevi E. coli s fimbrijama mogli koristiti za pripravu djelotvornih i sigurnih vakcina protiv zaraza ETEC sojevima. Većina radova o svinjskom imunološkom sustavu sluznice crijeva i pripravljanju oralnih vakcina bila je usredotočena na humoralnu imunost protiv F4+ ETEC sojeva. Našim istraživanjima obuhvaćeno je proučavanje štetnih učinaka i imunogenosti ne-ETEC sojeva dobivenih genetičkim inženjeringom koji imaju divlji tip ili rekombinantni plazmid za kodiranje F4 antigena, radi utvrđivanja uloge fimbrijskog antigena u (1) izazivanju dijareje i oštećenja sluznice tankoga crijeva, (2) poticanju upalnog odgovora limfatičnog tkiva probavila (LTP) i (3) stimuliranju zaštitnog imunološkog odgovora na površini sluznice posredovanog staničnim elementima LTP. F4ac+ ne-ETEC soj 2407 izaziva samo blaga oštećenja sluznice i može potaknuti umjerenu infiltraciju leukocita u jejunumu i ileumu. Zabilježen je porast subpopulacije CD8a+ (lamina propria LP), CD4a+ (Peyerove ploče = PP), te SWC1a+/CD8a+ (mezenterijski limfni čvor = MLČ) T limfocita. Oba ne-ETEC soja (1466 i 2407) pojačavaju odgovor limfocita iz PP i MLČ na uobičajene mitogene, F4ac antigen ili modifikatore imunološkog odgovora (MIO). Rezultati pokazuju da bi F4ac+ ne-ETEC soj 2407 mogao biti najbolji izvor zaštitnog antigena u pripravi sigurne i djelotvorne žive oralne vakcine protiv kolibaciloze odbijene prasadi. Međutim, prije konačnih zaključaka (i svakako terenskog pokusa) bilo bi potrebno testirati vakcinalni antigen u zaštiti (1) F4 receptor-pozitivne (prijemčive) i negativne (otporne) prasadi, te u (2) kombinaciji sa MIO (peptidoglikan monomer i Baypamun) in vivo.
Ciljevi istraživanja: Temeljna je hipoteza projekta da bi F4
fimbrijski antigen enterotoksigenog E.coli (ETEC) soja, ali i ne-ETEC
sojeva, mogao potaknuti, osim već poznatoga lokalnog humoralnog imunološkog
odgovora (sekrecijski IgA), i (do sada slabo istraženi) stanični imunološki
odgovor limfatičnog tkiva probavila (LTP) odbijene prasadi, koji bi se
ispoljavao pojačanom infiltracijom i reaktivnošću (proliferacijom)
limfoidnih stanica iz lamine proprije (LP) tankoga crijeva, Peyerovih ploča
(PP) i mezenterijskih limfnih čvorova (MLČ). Iz ovako postavljene hipoteze
proizašla su tri glavna pitanja: (1) hoće li F4+ ne-ETEC sojevi (autentični
i rekombinantni) izazvati jednako dobar stanični imunološki odgovor LTP kao
i F4+ ETEC soj, a da pri tome ne oštete sluznicu tankoga crijeva pokusno
zaražene prasadi, (2) može li se tako uspostavljena crijevna zaštitna
imunost i nespecifično pojačati primjenom modifikatora imunološkog odgovora
(MIO), i (3) mogu li oralno dati alogenski imunoglobulini (Ig) ili
fimbrijska vakcina zaštititi prasad od prirodne ili pokusno izazvane
kolidijareje, na koja smo potražili odgovore zadavanjem slijedećih ciljeva
istraživanja: -utvrditi učestalost i značenje crijevnog receptora za
F4+ETEC sojeve u prasadi i postaviti test za utvrđivanje nasljedno otpornih
(receptor-negativnih) životinja; -provjeriti zaštitni učinak fimbrijske
vakcine (Colimix) u specifičnoj, a alogenskih Ig u nespecifičnoj
imunoprofilaksi dijareje izazvane F4+ ETEC sojevima u nasljedno prijemčive
i otporne prasadi; -utvrditi kvantitativne odnose i smještaj in situ
subpopulacija T limfocita (SWC1+, CD2+, CD4+, CD8+ stanica) u LP, PP i MLČ
prasadi pokusno zaražene F4+ ETEC ili ne-ETEC sojevima; -procijeniti
funkcijske osobitosti T i B limfocita iz LTP u in vitro testovima (s
mitogenima, F4 antigenom ili MIO) nakon in vivo dodira s F4 fimbrijskim
i/ili enterotoksinskim antigenima; -odrediti opseg i stupanj oštećenja
sluznice tankoga crijeva (na mikroskopskoj i submikroskopskoj razini)
pokusno inokulirane pasadi. Rezultati dobiveni temeljem ovako postavljenih
ciljeva trebali bi dati doprinos boljem razumijevanju uloge i učinkovitosti
lokalnih (crijevnih) mehanizama stanične imunosti LTP na bakterijsku
zarazu, a time ujedno omogućiti pripravu sigurne (bez toksina) i
djelotvorne (s F4 antigenom ) žive oralne vakcine za suzbijanje
kolidijareje (izazvane F4+ ETEC sojevima) u odbijene prasadi.
SURADNJA - PROJEKTI
Naziv projekta
: 3-03-301 Trihineloza: Imunologija i
imunopatologija zoonoze Naziv ustanove: Zavod za parazitologiju i invazijske bolesti,
Veterinarski fakultet, Sveučilišta u Zagrebu Grad: 10000 - Zagreb, Hrvatska
Naziv projekta
: 3-03-315 Kontrola dominantnih bakterijskih
infekcija svinja Naziv ustanove: Veterinarski institut, Zagreb Grad: 10000 - Zagreb, Hrvatska
Naziv projekta
: 3-03-299 Utjecaj paragenetskih faktora na
patologiju u svinja Naziv ustanove: Zavod za patologiju i patološku morfologiju,
Veterinarski fakultet, Sveučilišta u Zagrebu Grad: 10000 - Zagreb, Hrvatska
Naziv projekta
: 3-03-340 Mikroklima i etologija u svinjogojskoj
proizvodnji Naziv ustanove: Zavod za zoohigijenu, Veterinarski fakultet,
Sveučilišta u Zagrebu Grad: 10000 - Zagreb, Hrvatska
Naziv projekta
: FG-CRO(YU) 933 Monitoring of swine pathology II Naziv ustanove: Zavod za patologiju i patološku morfologiju,
Veterinarski fakultet, Sveučilišta u Zagrebu Grad: 10000 - Zagreb, Hrvatska
Naziv projekta
: 1-08-303 Tumori i metastaze : Biologija i
liječenje Naziv ustanove: Zavod za animalnu fiziologiju
Prirodoslovno-matematičkog fakulteta, Sveučilišta u Zagrebu Grad: 10000 - Zagreb, Hrvatska
SURADNJA - USTANOVE
Naziv ustanove
: National Animal Disease Center, Ames, Iowa, SAD,
US Department of Agriculture, Agricultural Research Service Tip ustanove: Državni institut Tip suradnje: Zajednički projekt Grad: 50010 IA - Ames, SAD
Naziv ustanove
: Veterinary Institute of Hungarian Academy of
Sciences, Budimpešta, Mađarska Tip ustanove: Državni institut Tip suradnje: Povremena razmjena informacija Grad: HA-1581 - Budapest, Mađarska
Naziv ustanove
: University of Bristol, Veterinary Faculty Tip ustanove: Sveučilište/Fakultet Tip suradnje: Zajednički projekt Grad: Bristol, Velika Britanija Ostali podaci o projektu.